Specific IgG4 ELISA

Наборы Specific IgG ELISA для количественного определения аллерген-специфических IgG-антител с аллергенами иммобилизованными в лунках, разделяющихся на ячейки ломких стрипов, в человеческой сыворотке или плазме методом иммуноанализа ELISA созданы в виде модулей, совместимых с любым объёмом выполняемых лабораторией анализов. Антитела, также известные как иммуноглобулины (Ig), играют важную роль в гуморальном иммунном ответе на внешние возбудители инфекционных заболеваний. Кроме того, иммуноглобулины и, в частности, иммуноглобулины класса IgG могут появляться в случае безвредных в норме антигенов, например, вдыхаемых антигенов или пищевых антигенов. Обычно заболевание представляет собой экзогенные аллергические альвеолиты, которые могут быть вызваны воздействием веществ, содержащихся в воздухе на рабочем месте. Обычно это плесневые или бактериальные компоненты, но также это могут быть и экскременты, тонкодисперсные порошки или химические компоненты, которые вдыхаются в форме пыли или аэрозолей во время работы. Болезнь, известную как легкое фермера, вызывают термофильные актиномицеты, присутствующие в плесневелом сене. Заболевания такого рода представлены болезнью легкого фермера, болезнью легкого солодолопатчика и болезнью работающих с древесной массой, а также аллергозом голубеводов. Кроме того, известно, что рыбная мука, опилки, меховая пыль и химические компоненты тоже могут вызывать альвеолит.

Широкий спектр, более 800 исследуемых моно (индивидуальных) аллергенов во всех известных группах в том числе промышленные аллергены - синтетические и естественного происхождения вещества, биологические препараты и органические вещества. Промышленные химические металлы-аллергены: никель, хром, золото, медь, платина, кобальт, палладий, хлорид алюминия, молибден, амальгама. 106 видов лекарственных аллергенов (антибиотики, анестетики, анальгетики и НПВС, сульфаниламиды и др.), 50 видов грибковых аллергенов, 136 пыльцевых аллергенов (пыльца деревьев и кустарников, сорных трав и цветов, луговых трав и злаков), 54 эпидермальных аллергена и белков животного происхождения (эпидермис и шерсть животных), 19 инсекттных аллергенов (яды насекомых), 9 бытовых аллергенов (домашняя, библиотечная пыль и др.), 80 аллергенов связанные с профессиональной деятельностью и хобби, 322 пищевых аллергена и специй. А так же наличие 150 разнообразных микстов (смесей аллергенов) даёт уникальную возможность подбора аллергенов для каждого пациент индивидуально.

Длительные сроки годности аллергенов и реагентов создают основу для рационального планирования закупок, контроля за запасами, дают возможность увеличения списка тестируемых аллергенов, за счёт приобретения редких аллергенов не опасаясь финансовых потерь. Результатом подобной концепции будет улучшение оперативного управления материалопотоком, сокращение сроков доставки, ускорение оборота и получения экономии.

Назначение набора Тест на определение IgG4 методом твердофазного иммуноферментного анализа (IgG4-ELISA) предназначен для определения специфических IgG4 в сыворотке или плазме человека и поэтому разработан таким образом, чтобы контролировать титры специфических IgG4 во время лечения повышенной чувствительности. Реагенты необходимые для проведения анализа Тест-система каталожный номера 10104PG на 96 определения; Набор калибровочных проб (стандартов) каталожный номер 12004PG включает контроли; Стрипы с нанесенными аллергенами каталожные номера определяются комбинацией 13-код-№ аллергена-G. (из общего перечня аллергенов).

Принцип работы набора

Тест-система работает на основе метода твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) и позволяет определять антиген- (аллерген-) специфические антитела подкласса IgG4 в сыворотке или плазме человека. Разведенную сыворотку или плазму инкубируют в стрипах с нанесенным на их поверхность антигеном (аллергеном). Специфические IgG4 реагируют с соответствующим аллергеном. Несвязанные антитела удаляются промыванием. Связанные аллерген-специфические антитела распознаются вторичным антителом к IgG4 человека, конъюгированным с пероксидазой хрена. Связанные комплексы IgG4/антитела к IgG4/пероксидаза хрена промывают, добавляют раствор субстрата 3,3’,5,5’-тетраметилбензидина (ТМБ) и инкубируют с получением в итоге синего цвета. После прекращения ферментативной реакции с помощью кислоты происходит окрашивание в желтый цвет. Оптическую плотность (ОП) окрасившегося продукта измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм (референсная длина волны 620 нм). Концентрация sIgG4 в образце пациента пропорциональна значению оптической плотности. Калибровочные стандарты с известными концентрациями IgG4 анализируют одновременно с образцами пациента для получения калибровочной кривой. Неизвестные концентрации IgG4 в анализируемых образцах рассчитывают по данной кривой.

Состав компонентов набора

• Тест-система на 96 определения, в тест-систему входит конъюгат антител к IgG4 с ферментом, концентрированный (х25) буфер для промывки, буфер для разведения, ТМБ субстрат, стоп-раствор (25% H3PO4);
• Набор калибровочных проб, в набор входят референсные стрипы, 4 калибровочных стандарта (100, 250, 500, 2500 нг/мл), положительный и отрицательный контроли;
• Стрипы, разъединяющиеся на ячейки, с иммобилизованными в лунках аллергенами, 1 стрип х 8 лунок.

Аллергены в стрипах

Аллергены иммобилизованны в лунках, разделяющихся на ячейки ломких стрипов. Панель аллергенов может быть составлена индивидуально для каждого пациента. Перечень моно аллергенов охватывает более 800 наименований, во всех известных группах: пыльца деревьев и кустарников, луговые травы и злаки, сорные травы и цветы, лекарственные аллергены, плесневые и дрожжевые грибы, клещевые и домашней пыли аллергены, инсектные и яды насекомых, эпидермальные и белки животного происхождения, металлы, профессиональные аллергены, паразитарные, консерванты, пищевые и специи, что даёт уникальную возможность подбора аллергенов для каждого пациента индивидуально. Для скрининговых исследований предлагаются более 150 смесей аллергенов (микстов).

Каталожные номера аллергенов определяются комбинацией 13-код-№ аллергена-G. Все группы моно и микстов аллергенов поставляются в ломких микрострипах, каждый стрип по 8 лунок одного наименования. Лекарственные аллергены, металлы и некоторые профессиональные аллергены поставляются с контрольным HSA-стрипом (HSA-человеческий сывороточный альбумин) для контроля неспецифического связывания). При определении уровня специфических IgG4-антител к лекарственным аллергенам, металлам, некоторым профессиональным аллергенам образец должен быть параллельно проанализирован с контрольным HSA-стрипом. После вскрытия аллергены стабильны в течение всего срока годности составляющего два года и выше. Полный перечень моно и микстов аллергенов в стрипах смотрите здесь.

Аналитические характеристики Specific IgG4 ELISA

Оценка результатов: количественное в нг/мл и в классах от 0 до 4. Чувствительность: минимальная достоверно определяемая концентрация sIgG4 не превышает 100 нкг/мл. Стандартизация: стандарты прокалиброваны по Международному Стандарту ВОЗ для IgG4. Продолжительность исследования 2 часа 15 минут, инкубационный период (60 мин/60 мин/10 мин/5 мин). Объем образца 10 мкл. Максимально широкая панель аллергенов, стабильных и готовых к применению. Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Аллергены, тест-системы и калибровочные пробы стабилизированы и сохраняют свою активность в течение срока годности, указанного на этикетке. Сроки годности до двух лет и выше. Система обнаружения (OD 450nm/620nm). Хранение при температуре 2-8°C. Маркировка CE (европейское соответствие). Измерение оптической плотности проводится на любом современном плашечном спектрофотометре вертикального сканирования.

Тест-система, набор стандартов, стрипы с иммобилизованными в лунках аллергенами заказываются отдельно. Каталожные номера аллергенов определяются комбинацией <13-код-№ аллергена-G>. Полный перечень моно и микстов аллергенов в ломких стрипах смотрите в каталоге аллергенов.