Specific IgG ELISA

Наборы Specific IgG ELISA для количественного определения аллерген-специфических IgG-антител с аллергенами иммобилизованными в лунках, разделяющихся на ячейки ломких стрипов, в человеческой сыворотке или плазме методом иммуноанализа ELISA созданы в виде модулей, совместимых с любым объёмом выполняемых лабораторией анализов. Антитела, также известные как иммуноглобулины (Ig), играют важную роль в гуморальном иммунном ответе на внешние возбудители инфекционных заболеваний. Кроме того, иммуноглобулины и, в частности, иммуноглобулины класса IgG могут появляться в случае безвредных в норме антигенов, например, вдыхаемых антигенов или пищевых антигенов. Обычно заболевание представляет собой экзогенные аллергические альвеолиты, которые могут быть вызваны воздействием веществ, содержащихся в воздухе на рабочем месте. Обычно это плесневые или бактериальные компоненты, но также это могут быть и экскременты, тонкодисперсные порошки или химические компоненты, которые вдыхаются в форме пыли или аэрозолей во время работы. Болезнь, известную как легкое фермера, вызывают термофильные актиномицеты, присутствующие в плесневелом сене. Заболевания такого рода представлены болезнью легкого фермера, болезнью легкого солодолопатчика и болезнью работающих с древесной массой, а также аллергозом голубеводов. Кроме того, известно, что рыбная мука, опилки, меховая пыль и химические компоненты тоже могут вызывать альвеолит.

Широкий спектр, более 800 исследуемых моно (индивидуальных) аллергенов во всех известных группах в том числе промышленные аллергены - синтетические и естественного происхождения вещества, биологические препараты и органические вещества. Промышленные химические металлы-аллергены: никель, хром, золото, медь, платина, кобальт, палладий, хлорид алюминия, молибден, амальгама. 106 видов лекарственных аллергенов (антибиотики, анестетики, анальгетики и НПВС, сульфаниламиды и др.), 50 видов грибковых аллергенов, 136 пыльцевых аллергенов (пыльца деревьев и кустарников, сорных трав и цветов, луговых трав и злаков), 54 эпидермальных аллергена и белков животного происхождения (эпидермис и шерсть животных), 19 инсекттных аллергенов (яды насекомых), 9 бытовых аллергенов (домашняя, библиотечная пыль и др.), 80 аллергенов связанные с профессиональной деятельностью и хобби, 322 пищевых аллергена и специй. А так же наличие 150 разнообразных микстов (смесей аллергенов) даёт уникальную возможность подбора аллергенов для каждого пациент индивидуально.

Длительные сроки годности аллергенов и реагентов создают основу для рационального планирования закупок, контроля за запасами, дают возможность увеличения списка тестируемых аллергенов, за счёт приобретения редких аллергенов не опасаясь финансовых потерь. Результатом подобной концепции будет улучшение оперативного управления материалопотоком, сокращение сроков доставки, ускорение оборота и получения экономии.

Назначение набора Тест на специфические IgG методом твердофазного иммуноферментного анализа (IgG-ELISA) предназначен для количественного определения специфических IgG к вдыхаемым антигенам в сыворотке и плазме человека, тест помогает диагностировать так называемые реакции III типа со стороны легких (например, легкое фермера, легкое солодолопатчика, болезнь работающих с древесной массой и аллергоз птицеводов и др.). Реагенты необходимые для проведения анализа Тест-система каталожный номера 10100PG на 96 определения; Набор калибровочных проб (стандартов) каталожный номер 12001PG включает контроли; Стрипы с нанесенными аллергенами каталожные номера определяются комбинацией 13 - код - № аллергена - G. (из общего перечня аллергенов).

Принцип работы набора

Данный тест на специфические IgG (sIgG) основан на методе твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Он позволяет обнаруживать специфические IgG у пациентов с аллергиями III типа (экзогенные аллергические альвеолиты). Разведенные образцы сыворотки или плазмы пациентов инкубируют в стрипах с микролунками, на которые нанесены антигены. Во время инкубации специфические IgG связываются с антигенами, нанесенными на поверхность микролунок. После нанесения конъюгата антител к IgG человека с щелочной фосфатазой образуется комплекс антиген/IgG/конъюгат антител к IgG человека с щелочной фосфатазой. После внесения раствора p-нитрофенил-фосфата (pNPP) проводят количественное определение комплекса антител с ферментом. После добавления натрия гидроксида (NaOH) экстинкция окрашенного продукта реакции, пропорциональная количеству специфических IgG в образце, может быть измерена на длине волны 405 нм (референсная длина волны 620 нм). Калибровочные стандарты с известными концентрациями IgG используют для получения калибровочной кривой, по которой можно определять концентрации IgG.

Состав компонентов набора

• Тест-система на 96 определения, в тест-систему входит конъюгат антител к IgG с ферментом, концентрированный (х50) буфер для промывки, буфер для разведения, субстратный буфер, таблетки субстрата п-нитрофенилфосфат (pNPP), стоп-раствор (1 N NaOH);
• Набор калибровочных проб, в набор входят референсные стрипы, 5 калибровочных стандартов (0.25, 0.83, 2.5, 8.3, 25 мкг/мл), положительный и отрицательный контроли;
• Стрипы, разъединяющиеся на ячейки, с иммобилизованными в лунках аллергенами, 1 стрип х 8 лунок.

Аллергены в стрипах

Аллергены иммобилизованны в лунках, разделяющихся на ячейки ломких стрипов. Панель аллергенов может быть составлена индивидуально для каждого пациента. Перечень моно аллергенов охватывает более 800 наименований, во всех известных группах: пыльца деревьев и кустарников, луговые травы и злаки, сорные травы и цветы, лекарственные аллергены, плесневые и дрожжевые грибы, клещевые и домашней пыли аллергены, инсектные и яды насекомых, эпидермальные и белки животного происхождения, металлы, профессиональные аллергены, паразитарные, консерванты, пищевые и специи, что даёт уникальную возможность подбора аллергенов для каждого пациента индивидуально. Для скрининговых исследований предлагаются более 150 смесей аллергенов (микстов).

Каталожные номера аллергенов определяются комбинацией 13 - код - № аллергена - G. Все группы моно и микстов аллергенов поставляются в ломких микрострипах, каждый стрип по 8 лунок одного наименования. Лекарственные аллергены, металлы и некоторые профессиональные аллергены поставляются с контрольным HSA-стрипом (HSA-человеческий сывороточный альбумин) для контроля неспецифического связывания). При определении уровня специфических IgE-антител к лекарственным аллергенам, металлам, некоторым профессиональным аллергенам образец должен быть параллельно проанализирован с контрольным HSA-стрипом. После вскрытия аллергены стабильны в течение всего срока годности составляющего два года и выше. Полный перечень моно и микстов аллергенов в стрипах смотрите здесь.

Аналитические характеристики Specific IgG ELISA

Оценка результатов: количественное в мкг/мл и в классах от 0 до 5. Чувствительность: минимальная достоверно определяемая концентрация sIgG не превышает 0.25 мкг/мл. Стандартизация: стандарты прокалиброваны по Международному Стандарту ВОЗ для IgG WHO 67/97. Продолжительность исследования 2 часа 30 минут, инкубационный период (60 мин/60 мин/30 мин). Объем образца 10 мкл. Максимально широкая панель аллергенов, стабильных и готовых к применению. Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Аллергены, тест-системы и калибровочные пробы стабилизированы и сохраняют свою активность в течение срока годности, указанного на этикетке. Сроки годности до двух лет и выше. Система обнаружения (OD 450nm/620nm). Хранение при температуре 2-8°C. Маркировка CE (европейское соответствие). Измерение оптической плотности проводится на любом современном плашечном спектрофотометре вертикального сканирования.

Тест-система, набор стандартов, стрипы с иммобилизованными в лунках аллергенами заказываются отдельно. Каталожные номера аллергенов определяются комбинацией <код - № аллергена>. Полный перечень моно и микстов аллергенов в ломких стрипах смотрите в каталоге аллергенов.