Набор SLE Profile 8 ELISA для определения антител dsDNA, RNP/Sm, Sm, Ro52, La (SS-B), Scl-70, CENP-B, Jo-1

Циркулирующие аутоантитела (aab) класса IgG к внутриклеточным структурам, в частности, к экстрагируемым ядерным антигенам (ENA), являются характерной особенностью системных аутоиммунных заболеваний. Наиболее важные включают двухцепочечную ДНК (dsDNA), Ro, La, центромерные белки, Scl-70 (топоизомераза I, topo I), антиген Смита (Sm), рибонуклеопротеины (RNP), Jo-1 и PM/Scl. Аутоантитела к комплексу dsDNA и Sm считаются высокоспецифичными маркерами для определения системной красной волчанки (SLE) и могут обнаруживаться у 5-30% (Sm) и 20-70% (dsDNA) пациентов, страдающих системой красной волчанкой (SLE). Благодаря высокой специфичности аутоантител анти-Sm и анти-dsDNA в отношении заболевания, они были включены в диагностические критерии Американского колледжа ревматологии (ARC). Аутоантитела анти-RNP считаются связанными с системной красной волчанкой (SLE), но также выявляются и при других аутоиммунных воспалительных нарушениях. Системная склеродермия (SSc) характеризуется наличием аутоантител анти-Scl-70 и анти-CENP. Аутоантитела к Ro52 и La (SS-B) могут обнаруживаться в образцах пациентов, страдающих системной красной волчанкой (SLE), синдромом Шегрена (SjS), смешанным заболеванием соединительных тканей (MCTD) и системной склеродермией (SSc). Аутоантитела анти-Jo-1 впервые были описаны после выявления в сыворотке пациента, страдающего миозитом.

Описание Набор SLE Profile 8 ELISA каталожный номер 25023, предназначен для полуколичественного определения экстрагируемых ядерных антигенов (ENA) и помогает диагностировать системные заболевания соединительной ткани и контроля за их лечением (системная красная волчанки, синдром Шегрена, системная склеродермия, полимиозит/дерматомиозит, смешанное заболевание соединительной ткани).

Принцип работы набора

Метод - твердофазный иммуноферментный анализ. В набор включен планшет из 8-луночных стрипов, разделяемых на отдельные лунки. На поверхности каждой из восьми лунок стрипа иммобилизован один из восьми экстрагируемых ядерных антигенов (dsDNA, RNP/Sm, Sm, Ro52, La (SS-B), Scl-70, CENP-B, Jo-1). Сначала в микротитровальные лунки вносят разведённые образцы пациента, контроли и калибратор. Это приводит к связыванию антител с иммобилизованными экстрагируемыми ядерными антигенами (ENA). После промывания, добавляют конъюгат антител к IgG с пероксидазой хрена (HRP), который связывается с антителами. Несвязанное вещество удаляется в процессе еще одного цикла промывания. В конце, связывание анти-ENA визуализируют посредством инкубации с субстратом ТМБ (тетраметилбензидин). Оптическую плотность измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм.

Состав набора

Набор реагентов SLE Profile 8 ELISA на 8 x 12 определений. В набор входят стрипы для микротитрования с нанесенными антигенами, коньюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор (0.5 M H2SO4), буфер для разведения, калибратор, отрицательный контроль, положительный контроль.

Аналитические характеристики набора

Широкий диапазон измерений с низкой границей обнаружения от 0.1 до 10 относительных единиц. Один калибратор для всех параметров. Высоко очищенный синтетические, рекомбинантные и нативный антигены. Продолжительность исследования < 1,5 часа, небольшой инкубационный период (30 мин/30 мин/15 мин). 3 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения HRP/TMB (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Показатели результативности

Высокая корреляция с эталонными ИФА наборами. Превосходное «lot to lot» (от партии к партии) соответствие R² > 0,95. Низкая вариативность в пределах и за пределами тестирования. Высокая линейность по всей области измерений. Высокая чувствительность, основанная на использовании в реакции антигенов с линейными и конформационными эпитопами. Благодаря этому можно выявить практически весь спектр антител к экстрагируемому ядерному антигену.

Клинические значения

Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA) – это гетерогенная группа аутоантител, взаимодействующих с различными белками, относящимися к рибонуклеопротеинам. Набор SLE Profile 8 ELISA – тест, позволяющий выявить в сыворотке крови антитела к цитоплазматическим и ядерным антигенам. Антитела к экстрагируемому ядерному антигену являются клинико-лабораторным маркером различных системных заболеваний соединительной ткани и используются для их диагностики и контроля за их лечением. Анализ назначают при симптомах системного аутоиммунного процесса, таких как лихорадка, немотивированная слабость, артралгия и миалгия, кожные высыпания и некоторые другие. Они не являются характерными для какого-либо конкретного ревматического заболевания и могут наблюдаться при ревматоидном артрите, системной красной волчанке (СКВ), системной склеродермии, синдроме Шегрена, а также смешанном заболевании соединительной ткани и других состояниях. Набор SLE Profile 8 ELISA является методом скрининга ревматических болезней у пациентов с клиническими признаками аутоиммунного процесса. Повторные отрицательные результаты анализы свидетельствуют о том, что симптомы обусловлены какими-либо другими, не аутоиммунными причинами.