Набор SLE Profile 4 ELISA для определения антител dsDNA, Sm, RNP/Sm, Rib-P

Циркулирующие аутоантитела класса IgG к внутриклеточным структурам, в частности, к ядерным антигенам, являются характерной особенностью системных аутоиммунных заболеваний. Наиболее важные включают двухцепочечную ДНК (dsDNA), Ro52, Ro60, La, центромерные белки, Scl-70 (топоизомераза I, topo I), антиген Смита (Sm), рибонуклеопротеины (RNP), Jo-1 и PM/Scl. Антитела к комплексу dsDNA и Sm считаются высокоспецифичными маркерами для определения системной красной волчанки (SLE) и могут обнаруживаться у 5-30% (Sm) и 20-70% (dsDNA) пациентов, страдающих системой красной волчанкой (SLE). Благодаря высокой специфичности антител анти-Sm и анти-dsDNA в отношении заболевания, они были включены в диагностические критерии Американского колледжа ревматологии (ARC). Антитела к рибосомному фосфопротеину (Rib-P) можно обнаружить у 10-30% пациентов, страдающих системной красной волчанкой (SLE) с высокой специфичностью в отношении заболевания. Антитела анти-RNP считаются связанными с системной красной волчанкой (SLE), но также выявляются и при других аутоиммунных воспалительных нарушениях.

Описание Набор SLE Profile 4 ELISA каталожный номер 25019, предназначен для полуколичественного определения антител связанных с системной красной волчанкой (СКВ), методом твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты теста SLE Profile 4 ELISA помогают диагностировать системную красную волчанку и связанные системные аутоиммунные заболевания.

Принцип работы набора

Метод - твердофазный иммуноферментный анализ. В тест SLE Profile 4 ELISA входят четыре разных набора микротитровальных стрипов, окрашенных в разные цвета (4 x 24 лунки) и покрытых двухцепочечной ДНК (жёлтый цвет), антигеном Смита (оранжевый цвет), комплексом RNP/Sm (коричневый цвет) и Rib-P (бесцветный). Сначала в микротитровальные лунки вносят разведённые образцы пациента, контроли и калибратор. Это приводит к связыванию антител наличие которых характерно для системной красной волчанки (SLE), с иммобилизованными антигенами. После промывания, добавляют конъюгат антител к IgG с пероксидазой хрена (HRP), который связывается с антителами, характерными для системной красной волчанки (SLE). Несвязанное вещество удаляется в процессе еще одного цикла промывания. В конце, связывание антител характерных для системной красной волчанки (SLE) визуализируют посредством инкубации с субстратом ТМБ (тетраметилбензидин). Оптическую плотность измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм.

Состав набора

Набор реагентов SLE Profile 4 ELISA 4 x 24 определений. В набор входят стрипы для микротитрования с нанесенными антигенами, коньюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор (0.5 M H2SO4), буфер для разведения, калибратор, отрицательный контроль, положительный контроль.

Аналитические характеристики набора

Широкий диапазон измерений с низкой границей обнаружения от 0.1 до 10 относительных единиц. Один калибратор для всех параметров. Высоко очищенный синтетические, рекомбинантные и нативный антигены. Продолжительность исследования < 1,5 часа, небольшой инкубационный период (30 мин/30 мин/15 мин). 3 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения HRP/TMB (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Показатели результативности

Высокая корреляция с эталонными ИФА наборами. Превосходное «lot to lot» (от партии к партии) соответствие R² > 0,95. Низкая вариативность в пределах и за пределами тестирования. Высокая линейность по всей области измерений.

Клинические значения

Комбенированный тест SLE Profile 4 ELISA позволяет выявлять антинуклеарные антитела у 90-98% пациентов с системными заболеваниями, для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением. При различных системных заболеваниях в сыворотке крови обнаруживаются антитела, имеющие диагностическое значение - антитела к ДНК (dsDNA) - специфический маркер системной красной волчанки, высокий риск волчаночного нефрита, обнаруживаются в активной фазе системной красной волчанки, при этом их сывороточная концентрация коррелирует с тяжестью заболевания. Антитела к Смит-антигену (Sm) - антитела к Sm антигену являются специфическим маркером системной красной волчанки, и реже встречаются при других заболеваниях соединительной ткани. Антитела к RNP/Sm - чаще выявляются при смешанных заболеваниях соединительной ткани и реже при системной красной волчанке с низким риском поражения почек, склеродермия. Антитела к Рибосомы (Rib-P) - системная красная волчанка, риск поражения центральной нервной системы.
Отрицательный результат тестов, входящих в данную панель, значительно снижает вероятность диагноза системной красной волчанки (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях, что делает этот метод удобным средством для исключения системных заболеваний при неясной клинической картине.