Набор Scl-70 ELISA для определения антител анти-Scl-70

Циркулирующие аутоиммунные антитела класса IgG к внутриклеточным структурам, в частности, к ядерным антигенам, являются характерной особенностью системных аутоиммунных заболеваний. Антитела к Scl-70/ Топоизомеразе (topo-1) представляют собой высокоспецифичный маркер для диагностики системной склеродермии (SSc), также известной как склеродерма. Антитела анти-Scl-70 с высокой степенью распространенности можно обнаружить практически у 70% пациентов, страдающих системной склеродермией с диффузными кожными проявлениями, эти антитела связаны с тяжёлым течением болезни. Лабораторные данные, результаты инструментальных и гистологических исследований имеют относительную диагностическую ценность, как правило, отражая степень активности воспалительного процесса, глубину иммунных и структурных нарушений. Из современных иммунологических тестов наиболее специфичные и чувствительные для системной склеродермии являются: анти-Scl-70, антицентромерные и антинуклеарные антитела.

Описание Набор Scl-70 ELISA каталожный номер 25003, предназначен для полуколичественного определения антител анти-Scl-70, методом твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты теста Scl-70 ELISA помогают диагностировать системную склеродермию. Учитывая связь между антителами анти-Scl-70 и диффузными кожными проявлениями, а также степенью тяжести течения болезни, антитела анти-Scl-70 могут использоваться в качестве прогностического маркера.

Принцип работы набора

Метод - твердофазный иммуноферментный анализ. Поверхность лунок микропланшета покрыта рекомбинантным антигеном Scl- 70. Сначала в микротитровальные лунки вносят разведённые образцы пациента, контроли и калибратор. Это приводит к связыванию антител к анти-Scl-70 с иммобилизованным антигеном Scl-70. После промывания добавляют конъюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, который связывается с антителами анти-Scl-70. Несвязанное вещество удаляется при проведении другого цикла промывания. В конце, связывание антител к анти-Scl-70 визуализируют посредством инкубации с субстратом ТМБ (тетраметилбензидин). Оптическую плотность измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм.

Состав набора

Набор реагентов Scl-70 ELISA на 96 определений. В набор входят стрипы для микротитрования с нанесенными антигенами, коньюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор (0.5 M H2SO4), буфер для разведения, калибратор, отрицательный контроль, положительный контроль.

Аналитические характеристики набора

Широкий диапазон измерений с низкой границей обнаружения от 0.1 до 10 относительных единиц. Один калибратор для всех параметров. Рекомбинантный антиген. Продолжительность исследования < 1,5 часа, небольшой инкубационный период (30 мин/30 мин/15 мин). 3 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения HRP/TMB (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Показатели результативности

Высокая корреляция с линейным иммуноферментным анализом (LIA). Превосходное «lot to lot» (от партии к партии) соответствие R² > 0,95. Низкая вариативность в пределах и за пределами тестирования VK% < 8. Высокая линейность по всей области измерений.

Клинические значения

Анти-Scl-70 определяются у 20% пациентов с диффузным поражением кожи и быстропрогрессирующим течением системной склеродермии (ССД). В соответствии с диагностическими критериями, предложенными Leroy et al. (1988), при диффузной склеродермии у 30% пациентов обнаруживаются анти-Scl-70 и отсутствуют антицентромерные (АЦА), а при лимитированной склеродермии у 70–80% больных выявляются АЦА. Ведущими в диагностике ССД являются клинические симптомы болезни, а наличие анти-Scl-70 и АЦА и морфологическое исследование биоптатов только подтверждают диагноз, позволяют уточнить активность и характер патологических процессов. Морфологические изменения биоптатов кожи при ССД специфичны преимущественно у тех больных, у которых наблюдаются типичные клинические проявления заболевания. При стертом течении кожного синдрома в большинстве случаев характерная патология в биоптатах не определяется, преобладают фиброзно-склеротические изменения. Характерным для ССД является концентрическое утолщение интимы мелких сосудов с сужением их просвета. Продуктивный васкулит и тромбоваскулит характеризуют активность процесса. Обнаружение и контроль динамики уровня анти-Scl-70 и АЦА в сыворотке пациентов с ССД облегчают диагностику, включая ранние стадии заболевания, однако частота их выявления зависит от эволюции болезни. Сопоставление клинических симптомов, патоморфологических изменений в биоптатах, определение анти-Scl-70 и АЦА, лабораторных показателей активности процесса даёт возможность провести дифференциальную диагностику ССД с группой заболеваний с наличием фиброза и/или псевдосклеротических изменений при исследовании биоптатов.