Набор Leishmania infantum IgG ELISA

Лейшмании – простейшие, относящиеся к семейству трипаносоматиды. Паразиты существуют в двух формах: промастиготы в средней кишке насекомого-переносчика, и амастиготы в фаголизосомах макрофагов в организме их хозяина-млекопитающего. В макрофагах они живут в форме круглых неподвижных амастигот (3-7 мм в диаметре). Москиты поглощают макрофаги во время высасывания крови и в их желудок высвобождаются амастиготы. Практически сразу же амастиготы превращаются в подвижные, удлиненные (10-20 мкм), жгутиковые промастиготы, которые мигрируют в пищеварительный тракт москита и после размножения продвигаются вперед к слюнным железам насекомого. Лейшманиозы – широко распространенная в мире группа болезней, вызываемых паразитами. «Тип» определяется основной локализацией инфицированных макрофагов. У людей бывают четыре разные формы лейшманиоза с широким диапазоном клинических проявлений, все они могут иметь тяжелые последствия. Лейшманиозом в настоящее время поражено около 12 миллионов человек в 88 странах, все эти страны, кроме 16, являются странами развивающегося мира. По оценкам 350 миллионов человек подвергаются риску инфицирования разными видами паразитов лейшманий, частота новых случаев ежегодно составляет около 2 миллионов (1-1,5 миллиона случаев кожного лейшманиоза, 500000 случаев висцерального лейшманиоза). Висцеральный лейшманиоз является самой тяжелой формой заболевания, при котором уровень смертности в случае отсутствия лечения составляет практически 100%. Как и многие другие тропические болезни, лейшманиозы связаны с экономическим развитием и антропогенными изменениями окружающей среды, повышающими подверженность воздействию москитов-переносчиков заболевания. Географическая область распространения ограничивается ареалом москитов. СПИД и другие иммунодепрессивные состояния повышают риск развития висцеральной формы лейшманиоза у людей, инфицированных лейшманиями. Одновременное заражение лейшманиями/ВИЧ считается по-настоящему «новой болезнью», особенно в Юго-западной Европе, где 25-70% случаев висцерального лейшманиоза у взрослых связаны с ВИЧ-инфекцией, и 1.5-9.5% людей со СПИДом страдают от впервые приобретенного или реактивированного висцерального лейшманиоза. Установлено, что основную группу риска составляют потребители инъекционных наркотиков.

Описание

Набор Leishmania infantum IgG ELISA каталожный номер LEIG0310, предназначены для качественного определения антител класса IgG к лейшманиям (Leishmania infantum) в сыворотке или плазме человека, методом твердофазного иммуноферментного анализа.

Принцип работы набора

Качественное иммуноферментное определение антител к лейшманиям (Leishmania infantum) основано на методе твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). На лунки микротитрационных стрипов уже нанесены антигены Leishmania infantum для связывания соответствующих антител из образца. После промывания лунок для удаления несвязанного материала образца добавляют конъюгат белка A, меченного пероксидазой хрена (HRP). Этот конъюгат связывается с удержанными специфическими антителами к Leishmania infantum. Иммунный комплекс, образованный связанным конъюгатом, визуализируется посредством добавления тетраметилбензидинового субстрата (ТМБ), который в результате реакции дает продукт синего цвета. Интенсивность цвета данного продукта пропорциональна количеству специфических антител класса IgG к Leishmania infantum в образце. Реакцию останавливают добавлением серной кислоты. Это приводит к появлению желтого цвета в конечной точке. С помощью ридера для микролуночных планшетов для ИФА определяют оптическую плотность на длине волны 450 нм.

Состав набора

Набор реагентов Leishmania infantum IgG ELISA на 96 определений. В набор входят стрипы покрытые антигеном Leishmania infantum, конъюгат обработанного пероксидазой белка A, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор, буфер для разведения, положительный контроль, пороговый контроль, отрицательный контроль.

Аналитические характеристики набора

Специфичность диагностического метода составляет > 85%. Чувствительность диагностического метода составляет 91%. Продолжительность исследования 1 час 45 минут, небольшой инкубационный период (60 мин/30 мин/15 мин). 10 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Клинические значения

Существует две основные формы заболевания: висцеральный лейшманиоз (visceral leishmaniasis), при котором поражаются клетки различных внутренних органов, и кожный лейшманиоз (cutaneous leishmaniasis), при котором поражаются кожа и подкожные ткани. Инкубационный период при висцеральном лейшманиозе продолжается от 3 недель до 3 лет (чаще несколько месяцев). Заболевание начинается постепенно, нарастает общая слабость, появляется лихорадка, которая часто бывает волнообразной. Отмечается бледность кожи вследствие анемии, кожа может быть тёмной за счет поражения надпочечников, иногда наблюдается геморрагическая сыпь. Могут возникнуть язвочки в полости рта. Состояние больных прогрессивно ухудшается, они худеют, нарастают анемия, лейкопения, выявляется значительное увеличение печени (до пупочной линии) и селезёнки (до полости малого таза). Кожный лейшманиоз протекает в виде антропонозного и зоонозного типа. Антропонозный тип (поздно изъязвляющий кожный лейшманиоз городского типа, ашхабадка) характеризуется длительным инкубационным периодом (3-8 месяцев). На месте внедрения возбудителя образуется небольшой бугорок (диаметром 2-3 мм), медленно увеличивающийся и через 3-6 месяцев покрывающийся чешуйчатой корочкой, под которой обнаруживается язва с подрытыми неровными краями. Рубцевание проходит медленно и заканчивается через 1-2 года. Зоонозный тип ложного лейшманиоза (сельский тип) характеризуется более коротким инкубационным периодом (до 3 недель, бугорок на месте укуса быстро увеличивается, через несколько дней его диаметр достигает 10-15 мм. В центре бугорка происходит некроз и открывается язва с широким инфильтратом и отёком вокруг. Диаметр язвы иногда доходит до 5 см. К 3-му месяцу дно язвы очищается, а через 5 месяцев заканчивается рубцевание. Для диагноза имеют значение указание на пребывание в эндемичных по лейшманиозу местностях в последние 1-2 года, характерные клинические симптомы, картина крови. Доказательством болезни служит обнаружение лейшманий.