Набор Jo-1 ELISA для определения антител анти-Jo-1

Циркулирующие аутоантитела класса IgG к внутриклеточным структурам, в частности, к ядерным антигенам, являются характерной особенностью системных аутоиммунных заболеваний. Один из таких антигенов, Jo-1 (Аминоацил-тРНК-синтетаза), впервые был описан после выявления в сыворотке пациента, страдающего миозитом. Большой процент пациентов с антисинтетазным синдромом страдает интерстициальной болезнью легких, болезнью Рейно, а также имеют «руки механика» и артрит. Антитела анти-Jo-1 часто сопровождаются антителами анти-Ro52. В отличие от Jo-1, другие тРНК-синтетазы (например, PL-7, PL-12, OJ) могут быть мишенью для аутоантител, но частота таких случаев значительно меньше.

Описание Набор Jo-1 ELISA каталожный номер 25009, предназначен для полуколичественного определения специфических антител для белка Jo-1, методом твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты теста помогают диагностировать миозит и связанные аутоиммунные нарушения, указанные антитела следует использовать в качестве маркера, позволяющего прогнозировать течение заболевания.

Принцип работы набора

Метод - твердофазный иммуноферментный анализ. Поверхность лунок микропланшета покрыта рекомбинантным антигеном Jo-1. Сначала в микротитровальные лунки вносят разведённые образцы пациента, контроли и калибратор. Это приводит к связыванию антител к анти-Jo-1с иммобилизованным антигеном Jo-1. После промывания добавляют конъюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, который связывается с антителами анти-Jo-1. Несвязанное вещество удаляется при проведении другого цикла промывания. В конце, связывание антител к анти-Jo-1 визуализируют посредством инкубации с субстратом ТМБ (тетраметилбензидин). Оптическую плотность измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм.

Состав набора

Набор реагентов Jo-1 ELISA на 96 определений. В набор входят стрипы для микротитрования с нанесенными антигенами, коньюгат пероксидазы хрена (HRP) с антителами класса IgG, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор (0.5 M H2SO4), буфер для разведения, калибратор, отрицательный контроль, положительный контроль.

Аналитические характеристики набора

Широкий диапазон измерений с низкой границей обнаружения от 0.1 до 10 относительных единиц. Один калибратор для всех параметров. Рекомбинантный антиген. Продолжительность исследования < 1,5 часа, небольшой инкубационный период (30 мин/30 мин/15 мин). 3 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения HRP/TMB (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Показатели результативности

Высокая корреляция с линейным иммуноферментным анализом (LIA). Превосходное «lot to lot» (от партии к партии) соответствие R² > 0,98. Низкая вариативность в пределах и за пределами тестирования VK% < 8. Высокая линейность по всей области измерений.

Клинические значения

Антиген Jo-1 идентичен гистидил тРНК синтетазе (HRS) - ферменту, катализирующему добавление гистидина к тРНК. Хотя первоначально он был описан как ENA-антиген, дальнейшие исследования показали, что его локализация ограничена только цитоплазмой. Главный эпитоп описан в аминотерминальной области молекулы, в области, где белок образует кольцевидную трехмерную структуру - линейные пептиды, полученные из этой области, не взаимодействуют с анти-Jo-1-антителами. Анти-Jo-1-антитела превалируют при полимиозите (25%-35%). Также они часто связаны с интерстициальным легочным фиброзом. Присутствие у больных этих антител достоверно повышает риск развития интерстициального пневмонита.